目的在本室前期工作的基础上构建汉滩病毒M基因G1片段与S基因0.7kb片段嵌合基因的重组腺病毒.方法构建含有汉滩病毒G1S0.7嵌合基因的转移载体pShuttle-G1S0.7,然后通过特异性的酶切将嵌合基因与腺病毒DNA相连,电转化E.coli JM109,获得重组腺病毒Adeno-G1S0.7 DNA,转染HEK293细胞得到重组腺病毒.进一步对重组腺病毒的滴度和表达产物进行鉴定.结果构建的含G1S0.7嵌合基因的重组腺病毒,滴度可达1013~1015PFU/L;该重组腺病毒感染Vero-E6细胞后,表达出可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1的特异性单抗(mAb)所识别的融合蛋白.结论利用腺病毒表达系统,成功地表达同时具有核蛋白及糖蛋白G1生物学活性的融合蛋白,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础.
作者:张芳琳;刘勇;于澜;胡刚;吴兴安;史梦远;白文涛;王海涛;徐志凯
来源:免疫学杂志 2006 年 22卷 2期