目的:探讨组织因子途径抑制物(TFPI-2)与体外角膜基质细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达的关系.方法:体外兔角膜基质细胞原代、传代培养;脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染基质细胞,G418筛选阳性细胞,RT-PCR和Western-blot技术检测转染前后三组角膜基质细胞(转染TFPI-2基因组K-TFPI-2、转染空载体组K-V、未转染组K-P)中TFPI-2 mRNA以及相应蛋白质的表达水平;利用明胶酶谱法分析比较转染前后三组角膜基质细胞表达MMPs的活性差异.结果:K-TFPI-2组角膜基质细胞TFPI-2 mRNA和蛋白质的表达较K-P和K-V组显著上调(mRNA：0.79±0.02 vs 0.51±0.03和0.48±0.02,P=0.000 和 P=0.000;蛋白质：24.5±0.8 vs 15.5±0.5 和 14.9±0.9,P=0.000 和P=0.000);与K-P和K-V组相比,K-TFPI-2组细胞表达MMP-1,2的活性下降(MMP-1:12.3±0.7 vs 16.7±1.2 和15.9±0.7,P=0.001和P=0.003; MMP-2:15.4±1.3 vs 18.2±1.1 和 17.8±1.1,P=0.027 和P=0.046).结论:TFPI-2表达可明显抑制角膜基质细胞表达MMPs的活性,为进一步开展角膜新生血管性疾病的基因治疗提供实验依据.
作者：袁静；俞建雄；周炼红
来源：国际眼科杂志 2013 年 13卷 4期
