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目的:研究MRG15(死亡因子相关基因)在年龄相关性白内障( age-related cataract,ARC)、正常晶状体上皮细胞的表达差异。<br>  方法:性成熟的健康雌性SD大鼠40只,随机分为研究组、对照组,每组20只,研究组切除双侧卵巢、低浓度萘长间隔给药,建立围绝经期ARC模型;对照组常规饲养。以消减杂交改良法克隆MRG15,并对其cDNA片段应用地高辛标记制作探针。获取两组大鼠晶状体前囊膜切片后,再通过原位杂交法明确晶状体上皮细胞的表达差异。<br>  结果:克隆出的MRG15通过BamH1和EcoR1酶切以及琼脂糖电泳,可获取长为639bp的cDNA片段。 GeneBank对比显示,其同源性达到99.0%。原位杂交显示,ARC患者及正常晶状体上皮细胞内均可见MRG15表达。研究组阳性细胞百分率与对照组相较,有统计学差异(P<0.05)。研究组积分指数与对照组相较,有统计学差异( P<0.05)。结论:MRG15在ARC 和正常晶状体上皮细胞中均有表达,并且ARC较正常晶状体上皮细胞表达增高,这可能与MRG15对晶状体上皮细胞中一部分关键基因的转录产生抑制效应有关,通过降低晶状体上皮细胞的功能,使其出现衰老样改变,进而形成白内障,临床应对此进行更进一步的研究。

作者:靳三全

来源:国际眼科杂志 2015 年 3期

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作者:
靳三全
来源:
国际眼科杂志 2015 年 3期
标签:
死亡因子 相关基因 年龄相关性白内障 正常晶状体 上皮细胞 表达 death factor related genes age-related cataract normal lens epithelial cells expression
目的:研究MRG15(死亡因子相关基因)在年龄相关性白内障( age-related cataract,ARC)、正常晶状体上皮细胞的表达差异。<br>  方法:性成熟的健康雌性SD大鼠40只,随机分为研究组、对照组,每组20只,研究组切除双侧卵巢、低浓度萘长间隔给药,建立围绝经期ARC模型;对照组常规饲养。以消减杂交改良法克隆MRG15,并对其cDNA片段应用地高辛标记制作探针。获取两组大鼠晶状体前囊膜切片后,再通过原位杂交法明确晶状体上皮细胞的表达差异。<br>  结果:克隆出的MRG15通过BamH1和EcoR1酶切以及琼脂糖电泳,可获取长为639bp的cDNA片段。 GeneBank对比显示,其同源性达到99.0%。原位杂交显示,ARC患者及正常晶状体上皮细胞内均可见MRG15表达。研究组阳性细胞百分率与对照组相较,有统计学差异(P<0.05)。研究组积分指数与对照组相较,有统计学差异( P<0.05)。结论:MRG15在ARC 和正常晶状体上皮细胞中均有表达,并且ARC较正常晶状体上皮细胞表达增高,这可能与MRG15对晶状体上皮细胞中一部分关键基因的转录产生抑制效应有关,通过降低晶状体上皮细胞的功能,使其出现衰老样改变,进而形成白内障,临床应对此进行更进一步的研究。