目的:观察缺氧诱导因子-1α( hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)小干扰RNA( siRNA)对糖尿病大鼠视网膜组织中血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达的抑制作用,及其用于糖尿病新生血管性疾病治疗的可行性。<br> 方法:以pSilencer2.1-U6 neo为质粒载体,构建HIF-1α. siRNA重组质粒。选取雄性Sprague-Dawley( SD)大鼠54只,随机分为正常对照组(15只)和实验组(39只)。实验组采用尾静脉注射链尿佐菌素( STZ)的方法建立糖尿病大鼠模型,造模成功后将实验组随机分为糖尿病组(15只)、基因治疗组(12只)和空载体组(12只)。正常对照组及糖尿病组大鼠均不做转染;基因治疗组和空载体组分别转染HIF-1α. siRNA 重组质粒和pSilencer空载体质粒。行苏木精-伊红染色( hematoxylin-eosin staining,HE染色)观察视网膜组织形态,并采用免疫组织化学法检测VEGF蛋白的表达。分别于干扰后24、48、72h,1wk时计算VEGF蛋白的抑制效率。采用单因素方差分析和LSD-t检验进行统计学分析。<br> 结果:HIF-1α. siRNA 重组质粒经酶切、测序鉴定,确定为目的序列。 HE染色显示:正常对照组大鼠视网膜各层细胞排列整齐,细胞形态基本正常。糖尿病大鼠视网膜各层细胞排列紊乱,内界膜不完整,新生血管
作者:孟丽珠;陈松;陈蕾;刘艳;林锦镛;王玉川;韩梅
来源:国际眼科杂志 2015 年 10期