目的 探讨体外分离与纯化成人胰岛细胞的方法与可行性,为胰岛细胞移植治疗1型糖尿病提供大量高质量的胰岛细胞.方法 获取的成人胰腺组织称重后,采用Ⅴ型胶原酶消化法分离;再用Ficoll间断密度梯度离心纯化法纯化;在DTZ染色显微镜下,评价胰岛细胞的数量、纯度;并用体外培养、放射免疫测定胰岛素法鉴定胰岛细胞活性.结果 成人胰腺经胶原酶消化分离后,胰岛平均收获量(3 600 ±447)个/g胰腺;Ficoll间断密度梯度离心纯化后,胰岛平均收获量(2 140±207)个/g胰腺,纯度>70%;成人胰岛细胞培养2、4、6d后,测定其培养液中基础胰岛素浓度(mIU·L-1·100-1)分别为(3.302±1.63)、(3.504±1.10)、(2.921±1.13).结论 胶原酶消化法、Ficoll间断密度梯度离心纯化法分离纯化成人胰岛是有效的方法.
作者:江建新;孙诚谊
来源:中华内分泌外科杂志 2011 年 05卷 5期