目的探索最优的密度梯度离心方案,提高胰岛的纯度和得率,为胰岛移植相关研究奠定基础。方法采用雄性Balb/c小鼠作为供体分离胰岛,以0.5mg/ml胶原酶Ⅺ灌注和消化胰腺,通过不同的密度梯度离心策略分离纯化胰岛,进行双硫腙(DTZ)特异染色法染色,显微镜下观察胰岛的纯度和得率,并通过吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)染色检查分离获得的胰岛活性,最终确定最佳的密度梯度离心方法。结果 Balb/c小鼠在Ficol-1.108(4ml)、1.096(2ml)、1.069(2ml)、HBSS(2ml),加速度1、减速度1、400r/min、4min中转1800r/min、8min离心后胰岛得率为(125±39)IEQ、纯度为(79.6±10.5)
作者:张金花;邵益;厉智威;方程;田阳;严盛;郑树森
来源:浙江医学 2013 年 24期