目的:研究沉默miR-141表达对肾小管上皮细胞损伤的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:体外培养肾小管上皮细胞HK-2并分为:正常(5.5 mmol/L D-葡萄糖)组、高渗组、高糖(30 mmol/L D-葡萄糖)组、阴性对照+高糖组(转染NC inhibitor质粒)和si-miR-141+高糖组(转染miR-141 inhibitor)。miR-141和Sirt1 mRNA相对表达量用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)进行检测。DCFH-DA荧光染色、CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞中活性氧(ROS)生成量、细胞存活率和凋亡率。Sirt1/Nrf2信号通路相关蛋白的表达量用Western blot法检测。荧光素酶报告基因实验验证miR-141和Sirt1 mRNA之间的靶向关系。结果:①与正常组相比,转染si-miR-141后,细胞miR-141相对表达量降低(1.00±0.03 vs 0.52±0.06),差异有统计学意义(
F=278.104,
P<0.05);②与正常组[DCFH-DA荧光强度(7.18±0.59)
作者:姚建平;宁建文;钟晓敬;金月萍;邱蔚
来源:中华内分泌外科杂志 2021 年 15卷 3期