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目的:构建精氨酸甲基转移酶2( PRMT2)慢病毒表达载体。方法通过PCR扩增PRMT2 cD-NA,将PRMT2 cDNA连接于GV308载体,经测序确认后,将GV308/PRMT2与pHelper 1.0和pHelper 2.0共转染至293T细胞中,收获病毒,通过Real time PCR测定滴度;将PRMT2慢病毒表达载体侵染293T细胞,通过四环素诱导和Western blot检测PRMT2慢病毒表达载体的表达能力。结果在感染PRMT2慢病毒载体293T细胞中能检测到PRMT2-3Flag融合蛋白的表达。结论成功构建PRMT2的慢病毒表达载体。

作者:钟警;杨心治;张艳敏;高海花;秦旭平;格波

来源:中南医学科学杂志 2015 年 1期

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作者:
钟警;杨心治;张艳敏;高海花;秦旭平;格波
来源:
中南医学科学杂志 2015 年 1期
标签:
PRMT2 慢病毒载体 基因治疗 PRMT2 lentivirus gene therapy
目的:构建精氨酸甲基转移酶2( PRMT2)慢病毒表达载体。方法通过PCR扩增PRMT2 cD-NA,将PRMT2 cDNA连接于GV308载体,经测序确认后,将GV308/PRMT2与pHelper 1.0和pHelper 2.0共转染至293T细胞中,收获病毒,通过Real time PCR测定滴度;将PRMT2慢病毒表达载体侵染293T细胞,通过四环素诱导和Western blot检测PRMT2慢病毒表达载体的表达能力。结果在感染PRMT2慢病毒载体293T细胞中能检测到PRMT2-3Flag融合蛋白的表达。结论成功构建PRMT2的慢病毒表达载体。