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目的:研究在非小细胞肺癌及癌旁组织中ceacam1通过选择性拼接而产生的两种转录产物的调控机制.方法:将用PCR方法获得ceacam1基因中从内含子5至外显子8长1 606 bp DNA片段插入到真核表达载体pCMV中,构建成ceacam1迷你基因模型并与ptb基因共转染,用PCR法鉴定转染后的产物变化;根据外显子7序列设计的探针GAE(16-nt)及ACE(8-nt)进行凝胶阻滞分析实验.分离与探针结合的蛋白并进行质谱分析.结果:ptb 3种cDNA与ceacam1迷你基因共转染后,CEACAMlL表达水平下降,其中ptb 4对迷你基因的表达产物影响最大.仅转染迷你基因的细胞中ceacam1L在两条带中所占比例为76.7

作者:袁榴娣;丁洁;缪峰

来源:东南大学学报(医学版) 2006 年 25卷 6期

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作者:
袁榴娣;丁洁;缪峰
来源:
东南大学学报(医学版) 2006 年 25卷 6期
标签:
迷你基因 选择性拼接 癌胚抗原相关的细胞粘附分子1 拼接因子PTB 凝胶阻滞分析 非小细胞肺癌
目的:研究在非小细胞肺癌及癌旁组织中ceacam1通过选择性拼接而产生的两种转录产物的调控机制.方法:将用PCR方法获得ceacam1基因中从内含子5至外显子8长1 606 bp DNA片段插入到真核表达载体pCMV中,构建成ceacam1迷你基因模型并与ptb基因共转染,用PCR法鉴定转染后的产物变化;根据外显子7序列设计的探针GAE(16-nt)及ACE(8-nt)进行凝胶阻滞分析实验.分离与探针结合的蛋白并进行质谱分析.结果:ptb 3种cDNA与ceacam1迷你基因共转染后,CEACAMlL表达水平下降,其中ptb 4对迷你基因的表达产物影响最大.仅转染迷你基因的细胞中ceacam1L在两条带中所占比例为76.7