目的:比较5种不同分化培养方法对小鼠神经母细胞瘤N2a细胞形态、分化情况、分化标志物及增殖、凋亡的影响.方法:N2a细胞分别以D10[DMEM+ 10％胎牛血清(FBS)]完全培养基和不同分化培养基D1 (DMEM+1％ FBS)、D0(不含FBS的DMEM培养基)、30％ OM(DMEM+30％ Opti-MEMⅠ)、D2+视黄酸(RA)(DMEM +2％FBS+ 10 μmol·L-1 RA)和D1+RA(DMEM+ 1％FBS+ 10 μmol·L-1RA)培养后显微镜明场随机拍照,观察不同时间点的分化比例、突起长度及突起数量;免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测神经元标志物的表达;EdU掺入流式细胞术、CCK-8和Annexin V/PI双染流式细胞术检测不同培养方法对细胞增殖和凋亡的影响.结果:中等密度培养条件下D0组72 h分化比例为(35.92±2.63)％,D1、30％ OM、D2+RA和D1 +RA组96 h分化比例分别为(10.40±2.05)％、(29.70±4.98)％、(11.37±2.56)％和(45.13±8.75)％;分化后神经元标志物微管蛋白beta-Ⅲ(βⅢ-tubulin)和生长相关蛋白43(GAP43)表达上调.D0组分化培养24 h后即可见长突起,突起以单支为主,但增殖能力较D10和30％ OM组低,凋亡和死亡比例高,72 h后细胞状态差,大部分死亡.D1 +RA组分化培养24 h也可见长突起,细胞呈多支生长,增殖能力也较D10和30％ OM组低,凋亡和死亡比例高.30％OM组分化72 h才见较

作者：殷莹；胡亚玲；龚玲丽；纪丽；邹健

来源：东南大学学报（医学版） 2019 年 38卷 5期