目的 体外分离及培养人肝癌组织中的肝癌干细胞并鉴定其生物学特性.方法 取临床肝癌患者术后肝癌组织,用酶消化法分离肝癌细胞,将其接种于无血清培养基中培养,并在超低粘附24孔板中观察肝癌干细胞克隆球生长情况;用MTT比色法检测肝癌于细胞克隆球增殖能力;采用流式细胞仪鉴定并分选CD90+细胞、CD90-细胞,CD133+细胞、CD133-细胞,将4种不同细胞组成CD90+细胞CD133+细胞、CD90-细胞CD133+细胞、CD90+细胞CD133-细胞及CD90-细胞CD133-细胞,分别接种于裸鼠右侧腋窝皮下观察其成瘤能力并记录肿瘤体积;将裸鼠肿瘤组织HE染色观察.结果 在无血清培养基中,肝癌干细胞可以形成少量的细胞克隆球;在72h内肝癌干细胞克隆球始终处于持续增殖状态;肝癌干细胞表面标记物CD90、CD133阳性率分别是7.2％、8.8％,并成功分选出CD90+细胞、CD90-细胞、CD133+细胞、CD133-细胞,将重组的4种不同细胞组分别接种于裸鼠皮下,结果显示,CD90+细胞CD133+细胞、CD90-细胞CD133+细胞及CD133+细胞CD90-细胞在裸鼠体内均形成肿瘤,CD90+细胞CD133+细胞接种1个月后开始有裸鼠成瘤,CD90-细胞CD133+细胞与CD133+细胞CD90-细胞接种至第2个月开始有裸鼠成瘤,而CD133-细胞CD90-细胞在整个过程中未见肿瘤形成.CD90+细胞CD133+细胞组肿瘤体积大于CD90
作者：马俊明；雷鹏；王琦
来源：宁夏医科大学学报 2015 年 37卷 8期
