目的 探讨重组生长分化因子-9(GDF-9)对人卵巢黄素化颗粒细胞周期及细胞增殖、凋亡的影响.方法 收集因输卵管和(或)男性因素而接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者的卵泡液进行密度梯度离心,收集黄素化颗粒细胞,接种于M199培养基进行原代培养,实验组在M199培养基中添加100ng·mL-1 GDF-9因子,对照组未添加GDF-9因子;培养48h后,用CCK-8试剂盒测定细胞增殖情况;用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡;Western blot法检测裂解的半胱氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase-3)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化表达水平.结果 原代培养的人黄素化颗粒细胞在培养第2～4天时处于分裂增殖高峰期,贴壁培养24h再添加GDF-9因子作用48h后,细胞周期检测结果显示,GDF-9使颗粒细胞周期表现为GO/G1期的比例明显减少,S+G2/M期的比例明显增高(P＜0.05).细胞凋亡检测结果显示,颗粒细胞凋亡率显著减少(P＜0.05).Western blot检测发现,添加GDF-9使cleaved-caspase-3蛋白的相对表达量降低,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的相对表达量显著增高(P＜0.05).结论 重组GDF-9因子可促进颗粒细胞增殖,抑制颗粒细胞凋亡,其机制可能与活化ERK和抑制cleaved-caspase-3途径、调节细胞周期有关.
作者：马会明；李昕；王蒙蒙；王永峰；田洪成；王飞苗；王燕蓉；裴秀英
来源：宁夏医科大学学报 2016 年 38卷 5期
