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目的观察中波段紫外线(UVB)照射诱导人永生化角质形成细胞(HaCaT 细胞)的凋亡和对细胞静息Ca2+及thapsigargin和adrenaline引起的Ca2+运动影响.方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法分析受UVB照射后细胞存活率的变化,用流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和Hoechst33258核染色法观察UVB对HaCaT细胞凋亡的影响,采用Fura-2/AM荧光分光光度法测定胞浆游离Ca2+浓度的变化.结果在125~625 J·m-2的UVB照射剂量之间和照射后培养时间24 h内的条件下,UVB照射以剂量和时间依赖的方式抑制细胞的存活率;在照射后培养时间18 h内以剂量依赖的方式诱导细胞凋亡;250 J*m-2 UVB照射后,细胞的静息钙迅速下降,在照射后第6 h静息钙降至最低,且thapsigargin(1.0 μmol·L-1)和adrenaline(10 μmol·L-1)所引起的钙释放及由此产生的钙内流也随照射后培养时间的延长而逐渐减少.结论 UVB照射可诱导HaCaT细胞的凋亡及引起细胞钙稳态的失衡.

作者:李沛波;关永源;贺华;丘钦英;周家国;周园;史小莲

来源:中国药理学通报 2004 年 20卷 4期

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李沛波;关永源;贺华;丘钦英;周家国;周园;史小莲
来源:
中国药理学通报 2004 年 20卷 4期
标签:
中波段紫外线 角质形成细胞 凋亡 钙信号
目的观察中波段紫外线(UVB)照射诱导人永生化角质形成细胞(HaCaT 细胞)的凋亡和对细胞静息Ca2+及thapsigargin和adrenaline引起的Ca2+运动影响.方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法分析受UVB照射后细胞存活率的变化,用流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳和Hoechst33258核染色法观察UVB对HaCaT细胞凋亡的影响,采用Fura-2/AM荧光分光光度法测定胞浆游离Ca2+浓度的变化.结果在125~625 J·m-2的UVB照射剂量之间和照射后培养时间24 h内的条件下,UVB照射以剂量和时间依赖的方式抑制细胞的存活率;在照射后培养时间18 h内以剂量依赖的方式诱导细胞凋亡;250 J*m-2 UVB照射后,细胞的静息钙迅速下降,在照射后第6 h静息钙降至最低,且thapsigargin(1.0 μmol·L-1)和adrenaline(10 μmol·L-1)所引起的钙释放及由此产生的钙内流也随照射后培养时间的延长而逐渐减少.结论 UVB照射可诱导HaCaT细胞的凋亡及引起细胞钙稳态的失衡.