目的 探讨Let-7f在结肠癌组织和结肠癌细胞株中的表达,分析上调Let-7f对人结肠癌细胞上皮间质转换(epithelial-mesenchymal Transition,EMT)和迁移侵袭能力的影响.方法 采用qRT-PCR检测Let-7f在结肠癌组织与癌旁组织中的表达,并检测Let-7f在结肠癌细胞系(HT29、loVo、SW480、SW620)和人正常结肠上皮细胞(NCM460)中的表达;采用基因转染技术将Let-7f模拟物转染人结肠癌细胞株HT29,qRT-PCR验证转染效率;Western blot检测转染前、 后结肠癌细胞中E MT相关分子标志物E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达变化;采用划痕愈合实验、Transwell小室法分别检测转染后的HT29细胞的迁移和侵袭能力变化.结果 qRT-PCR结果显示,Let-7f在结肠癌组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.01);同时,Let-7f在结肠癌细胞系(HT29、loVo、SW480和SW620)中的表达量均低于人正常结肠上皮细胞系(NCM460)(P均<0.01).转染Let-7f mimic 48h后,qRT-PCR检测转染效率显示:与阴性对照组(NC组)相比,Let-7f mimic转染组Let-7f表达水平升高(P<0.01).Western blot结果显示,Let-7f mimic转染组细胞中E-cadherin表达水平高于NC组(P<0.05),而N-cadherin和vimentin表达水平低于NC组(P<0.05).划痕愈合实验显示:Let-7f mimic转染组细胞划痕愈合率低于NC组
作者:苗雨;尹华;张旭;郭丹;张飞雄;阮继刚
来源:宁夏医科大学学报 2018 年 40卷 12期