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目的 探讨脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)对同型半胱氨酸(ho mocysteine,Hcy)致肝细胞脂质沉积的促进作用.方法 胱硫醚β-合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)基因缺陷杂合体(CBS+/-)小鼠CBS基因正常(CBS+/+)小鼠给予高蛋氨酸饮食12周,设CBS+/+Met组(CBS+/+小鼠高蛋氨酸饮食)和CBS+/-Met组(CBS+/-小鼠高蛋氨酸饮食);体外培养人正常肝细胞HL-7702并给予100μmol·L-1 Hcy干预,FABP4过表达腺病毒转染肝细胞.免疫荧光双染观察小鼠肝脏组织中脂质分化相关蛋白(adipose differ-entiation-related protein,ADFP)表达;实时定量PCR(RT-qPCR)和Western blot分别检测小鼠肝脏和人肝细胞HL-7702中FABP4的表达;肝细胞HL-7702油红O染色观察肝细胞内脂质状况.结果 CBS+/+Met和CBS+/-Met组小鼠的肝脏组织中肝细胞表面标记物Cytokeratin18呈现绿色荧光,与CBS+/+Met组相比,CBS+/-Met组小鼠肝脏中ADFP表达明显增多(P<0.01);肝脏中FABP4的mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)表达均升高.Hcy干预肝细胞HL-7702后胞质中红色脂质颗粒明显增多(P<0.05),FABP4的表达趋势与动物水平一致,均明显升高(P<0.01);在有或无Hcy干预肝细胞的情况下转染FABP4过表达腺病毒后肝细胞胞质内红色脂质颗粒均明显增多(P均<0.01).结

作者:邓梅;李桂忠;谢琳;张辉;郭伟;丁宁;刘圆;孙卓成;马胜超;张鸣号;杨晓玲;姜怡邓

来源:宁夏医科大学学报 2020 年 42卷 6期

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作者:
邓梅;李桂忠;谢琳;张辉;郭伟;丁宁;刘圆;孙卓成;马胜超;张鸣号;杨晓玲;姜怡邓
来源:
宁夏医科大学学报 2020 年 42卷 6期
标签:
脂肪酸结合蛋白4 同型半胱氨酸 肝细胞 脂质沉积
目的 探讨脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)对同型半胱氨酸(ho mocysteine,Hcy)致肝细胞脂质沉积的促进作用.方法 胱硫醚β-合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)基因缺陷杂合体(CBS+/-)小鼠CBS基因正常(CBS+/+)小鼠给予高蛋氨酸饮食12周,设CBS+/+Met组(CBS+/+小鼠高蛋氨酸饮食)和CBS+/-Met组(CBS+/-小鼠高蛋氨酸饮食);体外培养人正常肝细胞HL-7702并给予100μmol·L-1 Hcy干预,FABP4过表达腺病毒转染肝细胞.免疫荧光双染观察小鼠肝脏组织中脂质分化相关蛋白(adipose differ-entiation-related protein,ADFP)表达;实时定量PCR(RT-qPCR)和Western blot分别检测小鼠肝脏和人肝细胞HL-7702中FABP4的表达;肝细胞HL-7702油红O染色观察肝细胞内脂质状况.结果 CBS+/+Met和CBS+/-Met组小鼠的肝脏组织中肝细胞表面标记物Cytokeratin18呈现绿色荧光,与CBS+/+Met组相比,CBS+/-Met组小鼠肝脏中ADFP表达明显增多(P<0.01);肝脏中FABP4的mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)表达均升高.Hcy干预肝细胞HL-7702后胞质中红色脂质颗粒明显增多(P<0.05),FABP4的表达趋势与动物水平一致,均明显升高(P<0.01);在有或无Hcy干预肝细胞的情况下转染FABP4过表达腺病毒后肝细胞胞质内红色脂质颗粒均明显增多(P均<0.01).结