目的 研究异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)突变对人胶质瘤U87细胞迁移的影响.方法 以U87细胞为基础,用强力霉素(doxycycline)诱导表达突变IDH1(mutIDH1),实验分为doxycycline诱导表达组(dox+组)和非doxycycline诱导表达组(dox-组).HE染色观察两组细胞形态变化;通过Transwell细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Western blot检测细胞内mutIDH1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、GFAP及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关转录因子的表达水平.结果 U87细胞成功诱导表达mutIDH1:dox+组表达mutIDH1蛋白、dox-组不表达(P<0.01);与dox-组比较,dox+组胶质瘤U87细胞整体形态改变明显,细胞体积变大,树突变短或减少.Transwell结果显示,与dox-组比较,dox+组细胞迁移数量增加(P<0.05).细胞划痕实验显示,dox+组细胞在12、24 h细胞划痕愈合率均高于dox-组(P均<0.05).Western blot结果显示,上皮标志物E-cadherin在dox+组表达水平低于dox-组(P<0.05),间质标志物N-cadherin、Vimentin、胶质标记物GFAP在dox+组表达水平均高于dox-组(P均<0.05);EMT相关转录因子Snal1、Snal2、Twist1、Zeb2在dox+组表达水平均高于dox-组(P均<0.05).结论 IDH1突变通过促进上皮间质转化增强U87细胞迁移能力.
作者:徐辉;唐翠;曹相玫
来源:宁夏医科大学学报 2022 年 44卷 4期