目的：探讨L02肝细胞氧化损伤模型的构建方法。方法将L02肝细胞培养后分为损伤3 h组、6 h 组和12 h 组，每组再根据加入不同浓度的过氧化氢（H2 O2）分为100、200、300、500、750、1000μmol/L 6个亚组，对照组不加入H2 O2，分别在培养箱中继续孵育3 h、6 h或12 h后进行细胞计数试剂盒（CCK）-8检测。另1组L02肝细胞培养后分为损伤3 h组、6 h组和12 h组，损伤3 h组再根据加入H2 O2浓度不同分为100、200、300、500、750μmol/L 5个亚组，损伤6 h组分为100、200、300、500μmol/L 4个亚组，损伤12 h组分为100、200、300μmol/L 3个亚组，对照组不加入H2 O2，分别在培养箱中继续孵育3 h、6 h或12 h后进行Annexin V-异硫氰酸荧光素（FITC）/碘化丙啶（PI ）双染流式细胞检测。损伤模型的建立及鉴定：L02肝细胞培养后损伤组加入200μmol/L H2 O2，对照组不加入H2 O2。在培养箱中继续孵育6 h后检测细胞线粒体膜电位、丙二醛（MDA）、活性氧自由基（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）等指标。结果损伤3 h组中，200、300、500、750、1000μmol/L等各亚组的细胞存活率与对照组比较，差异有统计学意义（均为P＜0.01）；损伤6 h组中，各亚组细胞存活率与对照组比较差异均有
作者：赵辉；孟炜；易述红；陈规划
来源：器官移植 2014 年 4期
