目的:构建以BCG为载体的rBCG-HPV16E6-E7疫苗,研究rBCG-HPV16 E6-E7重组表达体对小鼠免疫功能的影响,初步评价此疫苗对HPV相关肿瘤(宫颈癌)细胞的免疫治疗作用.方法:电穿孔法将pIJ702-HPV16 E6-E7分泌型穿梭表达质粒导入BCG,构成rBCG-HPV16 E6-E7疫苗.Western blot法检测E7蛋白的表达.于C57BL/6小鼠皮下接种rBCG-HPV16 E6-E7,取其脾细胞与E7蛋白在体外共同培育,MTT法检测T淋巴细胞增殖活性,51Cr释放法体外分析免疫鼠的细胞毒性T淋巴细胞活性(cytotoxic T lymphocyte,CTL),ELISA法检测免疫鼠血清中抗E7特异性抗体和细胞因子的表达水平.结果:rBCG-HPV16 E6-E7重组疫苗能特异地表达HPV16 E7蛋白,将该疫苗免疫小鼠后,可刺激机体产生细胞因子,如IL-2、IFN-γ及抗E7抗体的含量明显升高(P<0.01);脾淋巴细胞在体外受到E7蛋白的再次刺激后,淋巴细胞增殖性反应以及CTL活性明显增强(P<0.01).结论:rBCG-HPV16 E6-E7能增强小鼠的细胞和体液免疫反应,可作为HPV16治疗性疫苗.
作者:赵立民;罗红敏;王春英;李翎
来源:中华肿瘤防治杂志 2006 年 13卷 8期