目的:构建针对多药耐药基因(MDR1)的RNA干扰(RNAi)表达克隆质粒.方法:采用Invitrogen公司的Block-iTTM U6 RNAi Entry Vector Kit和BLOCK-iT Lentiviral RNAi Expression System生产表达克隆质粒.针对MDR1人工设计合成一段寡核苷酸,依照试剂盒说明书分别构建MDR1 entry clone质粒和表达克隆质粒.以MDR1 entry clone质粒瞬时转染MCF-7/ADM细胞株,MTT法测细胞对ADM的耐药性及流式细胞仪测试P-gp表达情况.抗生素筛选表达克隆、抽提质粒电泳鉴定.结果:测序证实MDR1 entry clone质粒构建正确,无任何突变.转对照质粒组和转MDR1 entry clone质粒组,P-gp表达水平分别为(31.97±1.2)
作者：孙桂云；王明玉；魏玲
来源：中华肿瘤防治杂志 2007 年 14卷 9期
