目的:探讨靶向多药耐药蛋白-1 (MDR1)基因的RNA干扰(RNAi)对结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性的稳定逆转作用.方法:分别构建含编码#4029 MDR1 siRNA和#4123 MDR1 siRNA的质粒载体,并转染COLO 320DM结肠癌多药耐药细胞,采用G418筛选克隆细胞,经实时定量RT-PCR及Western blotting鉴定阳性克隆细胞.MTT法检测细胞活力并计算各抗肿瘤药的IC50.流式细胞术检测细胞周期并计算PI/AI值.流式细胞仪测定细胞内adriamycin药物累积浓度.结果:阳性克隆细胞(clone #4029和clone #4123)的MDR1 mRNA和P-gp的表达均被抑制.COLO 320DM结肠癌亲本细胞adriamycin及vincristine的IC50分别为9.616 μmol/L和0.358 μmol/L,而clone #4029的IC50分别降至1.094 μmol/L和0.023 μmol/L(P<0.01),clone #4123的IC50分别降至0.780 μmol/L和0.035 μmol/L(P<0.01).COLO 320DM结肠癌亲本细胞用adriamycin及vincristine处理后其PI/AI值分别为5.68及9.59,而clone #4029的PI/AI值分别降至2.74及3.59(P<0.01),clone #4123的PI/AI值分别降至2.75及3.24(P<0.01).COLO 320DM结肠癌亲本细胞用10 μmol/L adriamycin处理后细胞内adriamycin累积浓度为27.92,而clone #4029及clone #4123细胞内adriamycin累积浓度分别增加至187.24和215.57(P<0

作者：夏忠胜；朱兆华；陈其奎；钟英强；张立勇；刘仲敏；ADAM Bao-ling

来源：中国病理生理杂志 2009 年 25卷 5期