目的 探讨mdr1短发夹RNA(mdr1 shRNA)对人红白血病耐阿霉素细胞系K562/ADM的耐药逆转作用.方法 编码设计合成靶位mdr1基因mRNA具有19个碱基发夹结构互补的寡核苷酸模板,构建2个shRNA表达载体pSilencerTM 3.1-H1 neo mdr1-A和mdr1-B,将其稳定转染K562/ADM细胞.用RT-PCR法检测转染后K562/ADM细胞mdr1 mRNA表达,Western blot检测P-糖蛋白(P-gp)表达,流式细胞术和MTT法分别检测K562/ADM细胞凋亡和对阿霉素的敏感性,用激光共聚焦荧光显微镜观察并测定细胞内柔红霉素的积累.结果 在pSilencerTM 3.1-H1 neo mdr1-A和mdr1-B shRNA表达载体稳定转染的K562/ADM细胞,mdr1 mRNA表达分别减少到转染前的35.9
作者:干惠珠;张桂珍;卢振霞;卜丽莎;杨绍娟;高申;郑德明
来源:中华血液学杂志 2007 年 28卷 6期