目的:探讨缺氧对骨肉瘤细胞MG63核干细胞因子(NS)表达的调节及其机制.方法:反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测缺氧对NS转录和蛋白表达的影响；蛋白质印迹法检测在雷帕霉素抑制缺氧诱导因--1 α(HIF-1α)表达或激酶抑制剂预处理后NS在缺氧下的变化,检测NS调节的下游因子p53和活性Caspase-3蛋白表达的变化.结果:缺氧6、12和24 h后NS蛋白表达分别升高了1.26(P＞0.05)、1.58 (P＜0.05)和1.92倍(P＜0.01),NS的转录分别升高了1.33(P＞0.05)、1.49 (P＜0.05)和1.54倍(P＜0.05).蛋白激酶B(Akt)抑制剂wortman-nin逆转了缺氧对NS的上调,而细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂U0126、蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89和雷帕霉素则没有逆转缺氧对NS的上调.Akt活性在缺氧6、12和24 h后分别升高了1.51(P＞0.05)、1.56 (P＜0.05)和1.23倍(P＞0.05).尽管缺氧上调了NS的表达,但NS的下游因子p53与活性Caspase-3蛋白表达在缺氧后无明显变化.结论:缺氧通过增强Akt的活性上调了NS的表达.
作者：刘郁东；郑启新；吴宏斌；郭晓东；李景峰；郝少飞
来源：中华肿瘤防治杂志 2013 年 20卷 3期
