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目的:探讨miR-93对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法采用即时定量PCR法检测骨肉瘤细胞株143B、HuO9、Saos2、MG63、U2OS和G292和人成骨细胞系hFOB1.19中miR-93的表达水平,免疫印迹法检测裸露角质蛋白2( NKD2)的表达水平。脂质体转染构建miR-93低表达的143B和HuO9细胞,四甲基偶氮唑盐比色法检测转染后细胞的增殖情况,流式细胞术检测其凋亡情况。利用荧光素酶报告基因实验检测miR-93对NKD2的靶向作用,过表达NKD2,分析NKD2对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。结果 miR-93在骨肉瘤细胞系中明显高表达,NKD2显著低表达。转染miR-93抑制剂后明显抑制了143B和HuO9细胞的增殖,促进其凋亡。荧光素酶实验证实NKD2是 miR-93的直接靶基因, NKD2过表达抑制骨肉瘤细胞增殖,促进其凋亡。结论miR-93通过靶向抑制NKD2的表达促进骨肉瘤细胞增殖,抑制其凋亡,这对更深入探索骨肉瘤的诊断和治疗有着重要意义。

作者:王瑞金;时扣荣;张军;张敬;高戎戎;朱世长

来源:中华病理学杂志 2016 年 45卷 12期

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作者:
王瑞金;时扣荣;张军;张敬;高戎戎;朱世长
来源:
中华病理学杂志 2016 年 45卷 12期
标签:
骨肉瘤 细胞增殖 印迹法,蛋白质 Osteosarcoma Cell proliferation Blotting,Western
目的:探讨miR-93对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法采用即时定量PCR法检测骨肉瘤细胞株143B、HuO9、Saos2、MG63、U2OS和G292和人成骨细胞系hFOB1.19中miR-93的表达水平,免疫印迹法检测裸露角质蛋白2( NKD2)的表达水平。脂质体转染构建miR-93低表达的143B和HuO9细胞,四甲基偶氮唑盐比色法检测转染后细胞的增殖情况,流式细胞术检测其凋亡情况。利用荧光素酶报告基因实验检测miR-93对NKD2的靶向作用,过表达NKD2,分析NKD2对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。结果 miR-93在骨肉瘤细胞系中明显高表达,NKD2显著低表达。转染miR-93抑制剂后明显抑制了143B和HuO9细胞的增殖,促进其凋亡。荧光素酶实验证实NKD2是 miR-93的直接靶基因, NKD2过表达抑制骨肉瘤细胞增殖,促进其凋亡。结论miR-93通过靶向抑制NKD2的表达促进骨肉瘤细胞增殖,抑制其凋亡,这对更深入探索骨肉瘤的诊断和治疗有着重要意义。