目的:研究T24膀胱癌细胞中Toll样受体4(Toll like receptor-4,TLR4)信号通路活化对B7-H1表达的影响,并探讨其参与膀胱癌免疫逃逸的可能机制.方法:培养膀胱肿瘤T24细胞系,以脂多糖(lipopolysaecharides,LPS)模拟TLR4在体内的激活过程,分别用1μg/mL的LPS刺激T24细胞0、2、4、6、8和12 h,流式细胞技术检测T24细胞表面TLR4的表达,RT-PCR技术检测T24细胞中B7-H1 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测T24细胞中B7-H1蛋白的表达.结果:流式细胞学检测结果显示,以1 μg/mL的LPS刺激不同时间T24细胞TLR4表达的阳性率,0h为(3.34士0.86)%,2h为(6.71±1.38)%,4h为(9.71士1.24)%,6h为(11.57±0.91)%,8h为(25.24士5.32)%,12 h为(21.67士1.81)%,组间差异均有统计学意义,F=83.049,P<0.05.RT-PCR检测结果显示,LPS刺激0h时B7-H1 mRNA的相对表达量为0.86士0.06,2h为1.30±0.11,4h为1.67±0.20,6h为1.99±0.10,8h为2.57±0.23,12 h为1.51士0.04,组间差异均有统计学意义,F=84.719,P<0.05.蛋白质印迹检测结果显示,LPS刺激0h时B7-H1蛋白质相对表达量为0.66±0.08,2h为0.65±0.10,4h为0.87士0.11,6h为1.07±0.23,8h为1.45±0.19,12 h为1.13士0.06,组间差异均有统计学意义,F=195.258,P<0.05.TLR4表达分别与B7-H1 mRNA(r1 =0.753)
作者:公欣海;王永华;邵世修;董胜国;纪传彪;崔杰;隋爱华
来源:中华肿瘤防治杂志 2013 年 20卷 16期