目的:构建EB病毒(epstein-barr virus,EBV)EBNA1基因原核表达载体,并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用.方法:收集2003-02-01-2005-08-30中山大学附属肿瘤医院(216例)和江苏省肿瘤医院(84例)300例鼻咽癌(naso-pharyngeal carcinoma,NPC)患者的血清样本,同时收集2003-07-01-2005 07-30中山大学附属第三医院500名健康体检者标本作为对照组.以EBV DNA为模板,采用PCR法扩增目的基因EBNA1,定向克隆到原核表达载体pGEX-5X-1中,构建pGEX-5X-EBNA1重组质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达GST/EBNA1融合蛋白.经SDS-PAGE、蛋白质印迹法鉴定表达产物后,纯化目的蛋白作为包被抗原,制备ELISA试剂检测鼻咽癌患者和正常人群EBNA1-IgA抗体.结果:在大肠埃希菌中成功表达了GST/EBNA1融合蛋白,相对分子质量为54 × 103,ELISA法检测结果显示,鼻咽癌患者EBNA1-IgA抗体阳性检出率为80.7％ (242/300),对照组阴性检出率为91.0％ (455/500);EBV-IgA检测鼻咽癌患者抗体阳性检出率为82.3％(247/300),对照组阴性检出率为93.0％ (465/500),2种检测方法的阳性检出率(x2 =1.77,P=0.19)和阴性检出率(x2=1.36,P=0.25)比较,差异均无统计学意义.结论:初步评估了EB病毒GST/EBNA1重组融合蛋白在鼻咽癌血清筛选中的诊断价值,获得了在鼻咽

作者：胡波；陈忠城；周文营；吴兴平；梁志超；李林

来源：中华肿瘤防治杂志 2014 年 21卷 16期