目的 观察黄芩苷对人宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响,初步探讨其作用机制.方法 不同浓度(5、10、20、40、80和160 μg/mL)的黄芩苷作用于人宫颈癌HeLa细胞24、48和72 h后,采用CCK-8法检测黄芩苷对HeLa细胞增殖的影响;40 μg/mL黄芩苷作用于HeLa细胞24 h后,采用普通光学显微镜观察细胞形态学变化,Hoechst 33342染色后在荧光倒置显微镜下观察细胞核形态学改变;Annexin V/PI双染后采用流式细胞术检测细胞凋亡的改变;蛋白质印迹法检测Caspase家族中Caspase 3、8、9蛋白表达变化.结果 黄芩苷可明显抑制HeLa细胞增殖,随时间延长及剂量增加,细胞增殖抑制率也明显升高,P<0.05;经40 μg/mL黄芩苷处理24 h的HeLa细胞明显变小、变圆、且有凋亡小体产生,细胞核固缩、碎裂,呈现典型的凋亡形态学改变;40 μg/mL黄芩苷处理HeLa细胞24、48 h后细胞早期凋亡率分别为(10.5±1.5)%、(21.8±2.4)%,与对照组的(1.3±0.9)%相比,差异均有统计学意义,P<0.05;蛋白质印迹检测法结果表明,黄芩苷处理后Caspase-3蛋白由0.09上调至0.65,Caspase-8蛋白由0.04上调至1.22,Caspase-9蛋白由0.12上调至1.10,提示剪切片段蛋白的表达呈上调趋势.结论 黄芩苷可抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与激活Caspase相关.
作者:刘峰;俞勇;禹林昌;张之勇;史美燕;袁小芬;任霞;姜国胜
来源:中华肿瘤防治杂志 2015 年 22卷 9期