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目的 探讨p53、p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)及异构体△ASPP2在p53缺陷结肠癌细胞系HCT116-/-细胞中对自噬及凋亡的影响.方法 实验分为对照组、MMS组、MMS+ p53组、MMS+ASPP2+ p53组、MMS+ △ASPP2+ p53组和MMS+ ASPP2+△ASPP2+ p53组.应用ASPP2、△ASPP2及p53质粒转染HCT116-细胞,同时转染绿色荧光GFP-LC3质粒于各组细胞中,经甲基磺酸(MMS)处理后用荧光显微镜观察细胞自噬水平,蛋白质印迹法检测各组细胞自噬及凋亡相关蛋白表达水平,Calcein AM/PI染色检测细胞凋亡水平.结果 自噬水平对照组为(0.63±0.14)%,MMS组为(10.48±0.58)%,MMS+ p53组为(5.45±0.41)%,MMS+ ASPP2+p53组为(3.43±0.35)%,MMS+ △ASPP2+ p53组为(14.84±0.64)%,MMS+ ASPP2+ △ASPP2+ p53组为(12.29±0.58)%,差异有统计学意义,F=1 182.364,P<0.001;与MMS组比较,MMS+ p53组和MMS+ ASPP2+ p53组自噬水平下降,P值均<0.001;与MMS+ p53组相比,MMS+ ASPP2+ p53组自噬水平降低,P<0.001;MMS+△ASPP2+p53组自噬水平较MMS+ p53处理组增加,P<0.001;MMS+ ASPP2+△ASPP2+ p53组自噬水平较MMS+ ASPP2+p53组增加,P<0.001.凋亡率比较,对照组为(2.09±0.54)%,MMS组为(16.79±0.69)%,MMS+p53组为(33.70

作者:封晓昆;王贲士;王安娜;陈德喜;郭洪亮

来源:中华肿瘤防治杂志 2015 年 22卷 10期

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封晓昆;王贲士;王安娜;陈德喜;郭洪亮
来源:
中华肿瘤防治杂志 2015 年 22卷 10期
标签:
p53 p53凋亡刺激蛋白2 ASPP异构体 自噬 细胞凋亡 p53 apoptosis stimulating protein 2 of p53 isoform ASPP2 autophagy apoptosis
目的 探讨p53、p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)及异构体△ASPP2在p53缺陷结肠癌细胞系HCT116-/-细胞中对自噬及凋亡的影响.方法 实验分为对照组、MMS组、MMS+ p53组、MMS+ASPP2+ p53组、MMS+ △ASPP2+ p53组和MMS+ ASPP2+△ASPP2+ p53组.应用ASPP2、△ASPP2及p53质粒转染HCT116-细胞,同时转染绿色荧光GFP-LC3质粒于各组细胞中,经甲基磺酸(MMS)处理后用荧光显微镜观察细胞自噬水平,蛋白质印迹法检测各组细胞自噬及凋亡相关蛋白表达水平,Calcein AM/PI染色检测细胞凋亡水平.结果 自噬水平对照组为(0.63±0.14)%,MMS组为(10.48±0.58)%,MMS+ p53组为(5.45±0.41)%,MMS+ ASPP2+p53组为(3.43±0.35)%,MMS+ △ASPP2+ p53组为(14.84±0.64)%,MMS+ ASPP2+ △ASPP2+ p53组为(12.29±0.58)%,差异有统计学意义,F=1 182.364,P<0.001;与MMS组比较,MMS+ p53组和MMS+ ASPP2+ p53组自噬水平下降,P值均<0.001;与MMS+ p53组相比,MMS+ ASPP2+ p53组自噬水平降低,P<0.001;MMS+△ASPP2+p53组自噬水平较MMS+ p53处理组增加,P<0.001;MMS+ ASPP2+△ASPP2+ p53组自噬水平较MMS+ ASPP2+p53组增加,P<0.001.凋亡率比较,对照组为(2.09±0.54)%,MMS组为(16.79±0.69)%,MMS+p53组为(33.70