目的 探讨miR21基因表达改变对宫颈癌Siha细胞顺铂敏感性的影响.方法 采用脂质体介导法分别以mi-crOFFTM miR21 inhibitor、micrONTM miR21 mimic、miR21阴性对照试剂转染Siha细胞,实验分为miR21下调组、miR21上调组、阴性对照组及空白对照组.实时荧光定量PCR检测转染后各组细胞中miR21基因的表达水平;CCK-8比色法检测各组细胞对顺铂的半抑制率浓度(50% inhibitory concentration,IC50值);Annexin V/PI法检测顺铂处理后各组细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法,分别从mRNA和蛋白水平检测顺铂对各组细胞中PTEN、PDCD4基因表达的影响.结果 实时荧光定量PCR检测miR21基因的表达结果显示,miR21下调组的表达明显低于阴性对照组,miR21上调组的表达明显高于阴性对照组,F=255.525,P<0.001.CCK-8比色法检测结果显示,顺铂对miR21下调组的IC50值为(2.44±0.69) μg/mL,阴性对照组为(3.96±0.07) μg/mL;miR21上调组为(6.93±0.07) μg/mL,空白对照组为(4.05±0.03) μg/mL,F=870.118,P<0.001.Annexin V/PI检测结果显示,5μg/mL顺铂诱导miR21下调组的凋亡率为(64.36±2.47)%,阴性对照组为(4.2±0.17)%;miR21上调组为(0.06±0.03)%,空白对照组为(4.14±0.25)%,x2=10.385,P=0.016.实时荧光定量PCR检测PT
作者:李娟;周艳清;谭琳玉;赵琴;李剑琦;徐霞英;吕华兵;温启荣;生秀杰
来源:中华肿瘤防治杂志 2015 年 22卷 14期