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目的 卷曲螺旋结构域(coiled-coil domain containing,CCDC)结构基因家族与一部分肿瘤关系密切,但CCDC12与结直肠癌的关系还不明确.本研究探讨CCDC12基因对结直肠癌细胞HCT116凋亡的影响及其可能机制.方法 clone-67小干扰RNA(clone-67-siRNA)转染结肠癌细胞系HCT116抑制CCDC12表达;通过细胞计数法CCK-8检测细胞增殖情况;通过流式细胞术检测凋亡率;RT-qPCR和蛋白质印迹法检测对照组、con-siRNA组及转染组HCT116细胞CCDC12、PI3K、p-AKT和mTOR基因和蛋白表达.采用SPSS 17.0进行统计分析,分别采用t检验或单因素方差分析来比较各组间统计学差异.结果 clone-67-siRNA能有效沉默HCT116细胞CCDC12基因的表达,clone-67-siRNA沉默细胞中CCDC12基因后24 h检测到CCDC12基因表达为(35.68±2.97)%,48 h表达为(76.25±3·03)%,72 h表达为(54.33±1.51)%.抑制HCT116细胞中CCDC12表达后,转染组细胞活性(74.52±11.46)%明显低于对照组(100±14.33)%和con-siRNA组(95.97±13.53)%,F=10.825,P<0.001;凋亡率clone-67-siRNA组为(26.30±3.57)%,明显高于对照组的(13.10±2.15)%和con-siRNA组的(11.66±1.77)%,F=28.640,P<0.001.clone-67-siRNA转染HCT116后细胞中CCDC12、PI3K、p-AKT和mTOR的表达均降低,RT-qPCR结果(FC

作者:耿玮;叶智斌;梁巍;范亚男

来源:中华肿瘤防治杂志 2017 年 24卷 21期

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作者:
耿玮;叶智斌;梁巍;范亚男
来源:
中华肿瘤防治杂志 2017 年 24卷 21期
标签:
结直肠癌 卷曲螺旋结构域12 小干扰RNA 细胞凋亡 PI3K-AKT-mTOR信号通路
目的 卷曲螺旋结构域(coiled-coil domain containing,CCDC)结构基因家族与一部分肿瘤关系密切,但CCDC12与结直肠癌的关系还不明确.本研究探讨CCDC12基因对结直肠癌细胞HCT116凋亡的影响及其可能机制.方法 clone-67小干扰RNA(clone-67-siRNA)转染结肠癌细胞系HCT116抑制CCDC12表达;通过细胞计数法CCK-8检测细胞增殖情况;通过流式细胞术检测凋亡率;RT-qPCR和蛋白质印迹法检测对照组、con-siRNA组及转染组HCT116细胞CCDC12、PI3K、p-AKT和mTOR基因和蛋白表达.采用SPSS 17.0进行统计分析,分别采用t检验或单因素方差分析来比较各组间统计学差异.结果 clone-67-siRNA能有效沉默HCT116细胞CCDC12基因的表达,clone-67-siRNA沉默细胞中CCDC12基因后24 h检测到CCDC12基因表达为(35.68±2.97)%,48 h表达为(76.25±3·03)%,72 h表达为(54.33±1.51)%.抑制HCT116细胞中CCDC12表达后,转染组细胞活性(74.52±11.46)%明显低于对照组(100±14.33)%和con-siRNA组(95.97±13.53)%,F=10.825,P<0.001;凋亡率clone-67-siRNA组为(26.30±3.57)%,明显高于对照组的(13.10±2.15)%和con-siRNA组的(11.66±1.77)%,F=28.640,P<0.001.clone-67-siRNA转染HCT116后细胞中CCDC12、PI3K、p-AKT和mTOR的表达均降低,RT-qPCR结果(FC