目的 分析核糖核酸结合基序蛋白5 (RBM5)基因对人肺腺癌细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)获得性耐药的影响及作用机制.方法 采用低浓度吉非替尼逐步加量诱导法筛选人肺腺癌吉非替尼耐药细胞株A549/GR.RT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞RBM5表达水平;构建RBM5过表达重组质粒,建立稳定过表达RBM5的A549/GR细胞系;检测A549/GR细胞系中RBM5过表达重组质粒转染效率;采用光学显微镜检测过表达RBM5对A549/GR细胞形态变化的影响;采用CCK8实验检测过表达RBM5对A549/GR细胞EGFR-TKI敏感性的影响,同时筛选IC50,检测过表达RBM5对A549/GR细胞增殖活性的影响.分别采用细胞划痕实验、Transwell实验、流式细胞周期实验、TUNEL染色实验、Annexin V-FITC流式细胞凋亡及蛋白质印迹法实验检测过表达RBM5对A549/GR细胞运动、迁移、侵袭、周期分布和凋亡的影响.结果 与A549细胞比较,人肺腺癌耐药株细胞A549/GR中RBM5基因[(1.000±0.031)vs(0.424±0.054),t=12.327,P=0.021]和蛋白[(1.000±0.022)vs (0.531±0.032),t=11.173,P=0.017]均呈低表达.与转染空载质粒pcDNA3.1和空白对照组的A549/GR细胞比较,转染pcDNA3.1-RBM5质粒的A549/GR细胞中,RBM5基因(12.326±2.337,F=14.328,P=0.034)和蛋白(2.433±0.044,F=7.302,P=

作者：周思宇；门万夫；刘振东；姚尧

来源：中华肿瘤防治杂志 2021 年 28卷 18期