目的 探讨线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)在丁酸钠(NaB)抗结直肠癌(CRC)中的作用及可能机制.方法 单独用0、0.5、1.0、2.0、5.0和10.0 mmol/L NaB处理CRC HCT-116细胞24 h,MTT检测细胞活力.分别用50μmol/L自噬抑制剂氯喹(CQ)、30μmol/L凋亡抑制剂Z-VAD-FMK、30μmol/L坏死抑制剂Necrostatin-1、2 mmol/L活性氧(ROS)拮抗剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)、0.5 mmol/L精胺(Sp)和钌红(RR)预处理HCT-116细胞1 h,再给予5 mmol/L NaB处理24 h,MTT检测细胞活力,Hoechst染色法检测细胞凋亡,单丹磺酰尸胺(MDC)染色法检测细胞自噬,荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测细胞ROS含量,RT-PCR检测MCU mRNA水平,蛋白质印迹检测细胞MCU、p62、LC3-Ⅱ和PARP剪切体c-PARP蛋白水平.结果 MTT结果显示,对照组细胞存活率为(100.00±6.79)％,NaB组为(43.99±2.63)％,t=7.219,P<0.001.与单独NaB组比较,NaB+NAC组细胞存活率为(71.98±2.40)％,t=-7.329,P<0.001;NaB+RR组为(60.44±5.12)％,t=-3.151,P<0.05.荧光显微镜观察发现,NaB组细胞核呈皱缩浓染,细胞内酸性囊泡增多.荧光探针DCFH-DA结果显示,5 mmol/L NaB可增加HCT-116细胞绿色荧光强度,NAC+NaB组相较于单独NaB组可减少HCT-116细胞绿色荧光强度,Sp+NaB、RR+NaB组相较

作者：秦勇；孙小蝶；刘璐琳；卞中博；张秋玉；孙素霞

来源：中华肿瘤防治杂志 2022 年 20期