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目的 探讨6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)对肺癌细胞增殖及铁死亡影响,分析6PGD在肺癌中的生物学功能.方法 蛋白质印迹法检测6PGD在人肺癌细胞(PC9、H1975、A549、H1299、H460)和人正常肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)中的表达.选取肺癌A549和H460细胞进行慢病毒转染以敲低6PGD的表达,分别获得A549 sh-NC、A549 sh-6PGD、H460 sh-NC和H460 sh-6PGD组.采用不同浓度(0、20、40和60 μmol/L)6PGD活性抑制剂大黄素甲醚分别处理肺癌细胞.采用铁死亡抑制剂ferrostatin-1处理A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD细胞,分别获得A549 sh-6PGD-fer-rostatin-1和H460 sh-6PGD-ferrostatin-1组.CCK8法检测细胞增殖能力.流式细胞术检测细胞内脂质过氧化物及活性氧水平,蛋白质印迹法检测细胞内GPX4及SLC7A11水平,组间比较采用t检验.结果 6PGD在肺癌细胞PC9、H1975、A549、H1299和H460的表达量均高于正常肺支气管上皮细胞BEAS-2B,t值分别为33.2、16.7、33.5、9.2和34.9,均 P<0.05.慢病毒转染后,A549 sh-6PGD(0.45±0.06)和 H460 sh-6PGD 组(0.46±0.02)的细胞活力较 A549 sh-NC(1.00±0.00)和 H460 sh-NC 组(1.00±0.00)均降低,t值分别为 20.5 和 56.1,均 P<0.001.采用不同浓度(0、20、40和60 μmol/L)大黄素甲醚抑制6PGD的功能,结果显

作者:邓婉君;熊慧华;晁腾飞

来源:中华肿瘤防治杂志 2023 年 30卷 11期

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邓婉君;熊慧华;晁腾飞
来源:
中华肿瘤防治杂志 2023 年 30卷 11期
标签:
肺癌 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 铁死亡 谷胱甘肽过氧化物酶4 脂质过氧化
目的 探讨6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)对肺癌细胞增殖及铁死亡影响,分析6PGD在肺癌中的生物学功能.方法 蛋白质印迹法检测6PGD在人肺癌细胞(PC9、H1975、A549、H1299、H460)和人正常肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)中的表达.选取肺癌A549和H460细胞进行慢病毒转染以敲低6PGD的表达,分别获得A549 sh-NC、A549 sh-6PGD、H460 sh-NC和H460 sh-6PGD组.采用不同浓度(0、20、40和60 μmol/L)6PGD活性抑制剂大黄素甲醚分别处理肺癌细胞.采用铁死亡抑制剂ferrostatin-1处理A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD细胞,分别获得A549 sh-6PGD-fer-rostatin-1和H460 sh-6PGD-ferrostatin-1组.CCK8法检测细胞增殖能力.流式细胞术检测细胞内脂质过氧化物及活性氧水平,蛋白质印迹法检测细胞内GPX4及SLC7A11水平,组间比较采用t检验.结果 6PGD在肺癌细胞PC9、H1975、A549、H1299和H460的表达量均高于正常肺支气管上皮细胞BEAS-2B,t值分别为33.2、16.7、33.5、9.2和34.9,均 P<0.05.慢病毒转染后,A549 sh-6PGD(0.45±0.06)和 H460 sh-6PGD 组(0.46±0.02)的细胞活力较 A549 sh-NC(1.00±0.00)和 H460 sh-NC 组(1.00±0.00)均降低,t值分别为 20.5 和 56.1,均 P<0.001.采用不同浓度(0、20、40和60 μmol/L)大黄素甲醚抑制6PGD的功能,结果显