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为探讨COBRA相像蛋白(COBL)在竹子细胞发育过程中的作用,采用RT-PCR和RACE技术,从绿竹(Bambusa oldhamii)叶片中克隆到1个COBL同源基因BoCOBL(GenBank登录号:EU247930),cDNA全长为1743 bp。序列分析表明, BoCOBL编码含451个氨基酸的COBL蛋白,其N端具有1个明显的跨膜螺旋结构,C端具有1个糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白信号序列,属于糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白家族,为典型的膜蛋白。通过构建BoCOBL:GFP融合表达载体,并转化到烟草(Nicotiana tabacum)悬浮细胞中,表达分析表明BoCOBL:GFP融合蛋白定位于细胞膜上,而对照GFP的分布无特异性,证明BoCOBL基因编码的蛋白为膜蛋白。组织特异性表达分析表明,BoCOBL基因的表达模式为组成型,在根、茎、叶片和叶鞘中均有表达,但在茎中的表达丰度略低。这为深入研究BoCOBL基因在竹子中的功能奠定了基础。

作者:高志民;陈颖;胡陶;赵韩生

来源:热带亚热带植物学报 2013 年 6期

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高志民;陈颖;胡陶;赵韩生
来源:
热带亚热带植物学报 2013 年 6期
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绿竹 COBRA相像蛋白基因 分子特征 亚细胞定位 组织特异性表达 Bambusa oldhamii COBRA like protein (COBL) gene Molecular characteristics Subcellular localization Tissue speciifc expression
为探讨COBRA相像蛋白(COBL)在竹子细胞发育过程中的作用,采用RT-PCR和RACE技术,从绿竹(Bambusa oldhamii)叶片中克隆到1个COBL同源基因BoCOBL(GenBank登录号:EU247930),cDNA全长为1743 bp。序列分析表明, BoCOBL编码含451个氨基酸的COBL蛋白,其N端具有1个明显的跨膜螺旋结构,C端具有1个糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白信号序列,属于糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白家族,为典型的膜蛋白。通过构建BoCOBL:GFP融合表达载体,并转化到烟草(Nicotiana tabacum)悬浮细胞中,表达分析表明BoCOBL:GFP融合蛋白定位于细胞膜上,而对照GFP的分布无特异性,证明BoCOBL基因编码的蛋白为膜蛋白。组织特异性表达分析表明,BoCOBL基因的表达模式为组成型,在根、茎、叶片和叶鞘中均有表达,但在茎中的表达丰度略低。这为深入研究BoCOBL基因在竹子中的功能奠定了基础。