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目的 制备携带生存素抗原基因的重组腺相关病毒(AAV/Survivin),将该重组病毒感染树突状细胞(DC),观察DC激活的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对乳腺癌细胞的杀伤活性.方法 构建AAV/Suwivin质粒,制备相应的重组病毒后,测定其滴度和感染效率.将AAV/Survivin体外感染外周血单核细胞,并分化为DC.将该DC刺激产生抗原特异性CTL.以流式细胞技术检测DC和CTL功能,MTS检测CTL杀伤的特异性和有效性.结果 成功构建并制备AAV/Suwivin,其滴度为1012拷贝/ml,感染率为(94.74±3.83)%,激活的CTL对乳腺癌细胞株MCF7的杀伤率为(62.12±2.23)%,对抗原阴性细胞无杀伤作用,且具有MHC-Ⅰ类分子限制性.结论 经由本研究方法制备的DC,可有效地激活特异性杀伤乳腺癌细胞的CTL,为乳腺癌的靶向性细胞免疫治疗提供实验研究数据.

作者:李帆;史鹏燕;张慧;张明明;刘勇

来源:热带医学杂志 2017 年 17卷 1期

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作者:
李帆;史鹏燕;张慧;张明明;刘勇
来源:
热带医学杂志 2017 年 17卷 1期
标签:
树突状细胞 细胞毒性T淋巴细胞 生存素 腺相关病毒 乳腺癌 Dendritic cells Cytotoxic T lymphocytes Survivin Adeno-associated virus Breast cancer
目的 制备携带生存素抗原基因的重组腺相关病毒(AAV/Survivin),将该重组病毒感染树突状细胞(DC),观察DC激活的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对乳腺癌细胞的杀伤活性.方法 构建AAV/Suwivin质粒,制备相应的重组病毒后,测定其滴度和感染效率.将AAV/Survivin体外感染外周血单核细胞,并分化为DC.将该DC刺激产生抗原特异性CTL.以流式细胞技术检测DC和CTL功能,MTS检测CTL杀伤的特异性和有效性.结果 成功构建并制备AAV/Suwivin,其滴度为1012拷贝/ml,感染率为(94.74±3.83)%,激活的CTL对乳腺癌细胞株MCF7的杀伤率为(62.12±2.23)%,对抗原阴性细胞无杀伤作用,且具有MHC-Ⅰ类分子限制性.结论 经由本研究方法制备的DC,可有效地激活特异性杀伤乳腺癌细胞的CTL,为乳腺癌的靶向性细胞免疫治疗提供实验研究数据.