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目的:观察人胰腺癌MiaPaCa-2细胞总RNA电转染树突细胞(Dendritic Cell,DC)体外激发抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(Cytotoxic T Lymphocyte, CTL)的能力。方法自6例胰腺癌患者外周血单核细胞中分离、培养DC。使用电穿孔法将MiaPaCa-2细胞总RNA体外转录和PCR扩增的MUC1 mRNA转染DC,以未负载抗原的DC为对照。采用实时定量PCR技术检测各组DC中MUC1表达。四甲基偶氮唑盐(MTT)检测转染各组DC存活率变化;混合细胞培养法评价各组DC体外刺激自体T淋巴细胞增殖能力;ELISA法检测各组DC体外激发抗原特异性CTL细胞因子释放量。结果 MiaPaCa-2总RNA与MUC1 mRNA分别转染后48 h DC中目标抗原的相对表达量分别为37.24±3.17和34.53±2.02,两者比较无显著差异(P>0.05)。电转染后96 h MiaPaCa-2总RNA转染组DC存活率降至60.81

作者:陈江;牟为民;邵晓东;王迪;许文达;郭晓钟

来源:现代消化及介入诊疗 2014 年 5期

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作者:
陈江;牟为民;邵晓东;王迪;许文达;郭晓钟
来源:
现代消化及介入诊疗 2014 年 5期
标签:
树突细胞 RNA转染 胰腺肿瘤 细胞毒性T淋巴细胞 Dendritic cells RNA transfection Pancreatic cancer Cytotoxic T lymphocytes
目的:观察人胰腺癌MiaPaCa-2细胞总RNA电转染树突细胞(Dendritic Cell,DC)体外激发抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(Cytotoxic T Lymphocyte, CTL)的能力。方法自6例胰腺癌患者外周血单核细胞中分离、培养DC。使用电穿孔法将MiaPaCa-2细胞总RNA体外转录和PCR扩增的MUC1 mRNA转染DC,以未负载抗原的DC为对照。采用实时定量PCR技术检测各组DC中MUC1表达。四甲基偶氮唑盐(MTT)检测转染各组DC存活率变化;混合细胞培养法评价各组DC体外刺激自体T淋巴细胞增殖能力;ELISA法检测各组DC体外激发抗原特异性CTL细胞因子释放量。结果 MiaPaCa-2总RNA与MUC1 mRNA分别转染后48 h DC中目标抗原的相对表达量分别为37.24±3.17和34.53±2.02,两者比较无显著差异(P>0.05)。电转染后96 h MiaPaCa-2总RNA转染组DC存活率降至60.81