目的 研究人胰腺癌黏蛋白4 mRNA与人端粒酶反转录酶(hTERT) mRNA联合转染树突状细胞(DC)诱导的抗肿瘤免疫反应,为构建负载多抗原表位DC疫苗治疗胰腺癌提供实验依据.方法 自6例HLA-A2+的胰腺癌患者外周血单个核细胞中分离、培养DC.体外转录和扩增黏蛋白4和hTERT mRNA,电穿孔法将两者分别及联合转染DC,培养48 h.采用实时定量PCR和Western印迹技术检测DC中黏蛋白4和hTERT的表达.用MTT法监测转染前后DC存活率；使用IFN-γ释放试验(ELISA法)检测黏蛋白4 mRNA和(或)hTERT mRNA转染后DC诱导的CTL的活化反应.采用51Cr标准细胞毒实验检测转染黏蛋白4 mRNA和(或)hTERT mRNA后DC诱导的CTL对体外胰腺癌细胞株MiaPaCa-2、Capan-2、AsPC-1和Panc-1细胞的杀伤作用.采用studentt检验进行统计学处理.结果 黏蛋白4 mRNA与hTERT mRNA联合转染后48 h DC中两者的相对表达量分别为30.09±5.24和12.87±3.36,低于其分别转染时的相对表达量(38.54土6.21和36.35+5.03,t=3.469、6.721,P均＜0.05).黏蛋白4 mRNA与hTERT mRNA联合转染后96h DC存活率降至52.17％,低于分别转染时DC的存活率(均为80％左右).黏蛋白4和hTERT mRNA联合转染DC诱导的特异性CTL 24 h IFN-γ释放量达(32.57±2.01) U/mL,高于分别转染时DC诱导的CTL IFN-γ释放水

作者：陈江；郭晓钟；胡志刚；李宏宇；王迪；赵佳钧

来源：中华消化杂志 2013 年 33卷 11期