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目的 探究长链非编码核糖核酸生长组织特异性转录体5(LncRNA GAS5)通过AKT/mTOR通路对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外培养人结肠癌细胞SW480,随机分为对照组、LncRNA GAS5过表达质粒组、LncRNA GAS5空载质粒组、LncRNA GAS5 siRNA组、LncRNA GAS5 siRNA阴性对照组,分别转染质粒及siRNA后,采用实时荧光定量(qRT?PCR)检测各组细胞LncRNA GAS5表达,采用CKK?8、细胞克隆形成实验检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,免疫印迹检测各组细胞凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-1(Bcl?2)、关联BCL?2的蛋白质X(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase?3)]、AKT/mTOR通路蛋白[丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p?AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶点(p?mTOR)]表达情况.结果 与对照组相比,LncRNA GAS5 siRNA组SW480细胞LncRNA GAS5表达、凋亡率、Bax及caspase?3蛋白表达降低,细胞活力、相对细胞克隆形成、Bcl?2蛋白表达、p?AKT/AKT、p?mTOR/mTOR升高,差异均有统计学意义(P<0.05);LncRNA GAS5过表达质粒组SW480细胞LncRNA GAS5表达、凋亡率、Bax及caspase?3蛋白表达升高,细胞活力、相对细胞克隆形成、Bcl?2蛋白表达、p?AKT/AKT、p?mTOR/mTOR降低,差异均

作者:蔡国强;陈雪军;王峰

来源:热带医学杂志 2020 年 20卷 2期

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蔡国强;陈雪军;王峰
来源:
热带医学杂志 2020 年 20卷 2期
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LncRNA GAS5 AKT/mTOR通路 结肠癌SW480细胞 增殖 凋亡
目的 探究长链非编码核糖核酸生长组织特异性转录体5(LncRNA GAS5)通过AKT/mTOR通路对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外培养人结肠癌细胞SW480,随机分为对照组、LncRNA GAS5过表达质粒组、LncRNA GAS5空载质粒组、LncRNA GAS5 siRNA组、LncRNA GAS5 siRNA阴性对照组,分别转染质粒及siRNA后,采用实时荧光定量(qRT?PCR)检测各组细胞LncRNA GAS5表达,采用CKK?8、细胞克隆形成实验检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,免疫印迹检测各组细胞凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-1(Bcl?2)、关联BCL?2的蛋白质X(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase?3)]、AKT/mTOR通路蛋白[丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p?AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶点(p?mTOR)]表达情况.结果 与对照组相比,LncRNA GAS5 siRNA组SW480细胞LncRNA GAS5表达、凋亡率、Bax及caspase?3蛋白表达降低,细胞活力、相对细胞克隆形成、Bcl?2蛋白表达、p?AKT/AKT、p?mTOR/mTOR升高,差异均有统计学意义(P<0.05);LncRNA GAS5过表达质粒组SW480细胞LncRNA GAS5表达、凋亡率、Bax及caspase?3蛋白表达升高,细胞活力、相对细胞克隆形成、Bcl?2蛋白表达、p?AKT/AKT、p?mTOR/mTOR降低,差异均