用林麝( Moschus berezovskii)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)提取总RNA,RT-PCR扩增IL-2(interleukin-2, IL-2),连接pMD18-T载体后转化大肠杆菌,筛选阳性克隆并测序.然后将IL-2成熟肽编码序列连接到pGEX4T-1原核表达载体进行表达、纯化.结果表明林麝IL-2开放阅读框全长468 bp,编码155个氨基酸.序列分析表明,林麝IL-2及其受体结合域与水牛的高度保守,而在翻译后修饰的预测活性位点上和水牛的有所不同.IPTG诱导林麝IL-2蛋白表达,得到约41 kD的目标带;优化表达后,林麝IL-2表达含量达到了总蛋白量的25
作者:赖彬;徐柳;岳碧松;邹方东
来源:四川动物 2006 年 25卷 4期