目的 表达并纯化杀伤细胞受体KIR3DS1胞外区.方法 采用定向克隆的方法将KIR3DS1胞外区基因连接到pET28a-DsbA载体上,成功构建pET28a-DsbA/KIR3DS1重组质粒.将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导DsbA-KIR3DS1融合蛋白表达,溶解于8M尿素中的包涵体经Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化,成功进行复性,再经Su-perdex75凝胶层析柱进一步纯化,SDS-PAGE和WesterD blot鉴定目的蛋白的表达及纯化.结果 表达产物呈部分可溶性表达,包涵体纯化后证实获得纯度>95
作者:李晖;付秋霞;周勇;詹林盛;王全立;钟森
来源:四川医学 2010 年 31卷 8期