研究了5-AZA、Ang II 及其联合诱导人心脏干细胞向心肌细胞分化和提高分化率的方法。经患者或家属同意，从心外科手术中获取人心脏右心耳组织，Ⅱ型胶原酶消化、培养、传代，选用 P2～P8细胞与心脏干细胞抗体 CD117（c -kit）结合后，经流式细胞仪无菌分选纯化心脏干细胞，对分选纯化后的 c -kit ＋CSCs 进行培养（见前期试验）。选取无菌分选纯化后 c -kit ＋CSCs 进行诱导、分化实验。实验随机分为四组：对照组（普通心脏干细胞培养液）、5-AZA 诱导组、Ang II 诱导组、5-AZA 和 Ang II 联合诱导组。4周后用 Western Blotting 测定心肌细胞特异性蛋白 cTn I、Cx43的表达；用流式细胞仪测定各组心肌细胞分化率。人心脏干细胞诱导4周后，Western blotting 结果显示，四组均有 cTn I、Cx43表达，对照组表达最弱，5-AZA和 Ang II 联合组表达最强。人心脏干细胞诱导4周后流式细胞仪测定各组心肌细胞分化率，统计结果显示：对照组（27．86±4．52）％、5-AZA 组（52．71±7．40）％、Ang II 组（40．48±7．02）％、5-AZA 和 Ang II 联合组（64．74±6．11）％；四组间均有统计学差异（P ＜0．05）。5-AZA 、Ang II 均能诱导人 c -kit ＋CSCs 分化为心肌细胞，5-AZA 和 Ang II 联合诱导的心肌细胞分化率高于5
作者：侯红；吕安林；达晶；侯兆蕾
来源：生物医学工程研究 2015 年 3期
