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目的 利用非整合质粒载体在体外将成人外周血中单个核细胞重编程为少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells, OPCs).方法 经外周静脉采集志愿者血液5 mL,利用Ficoll-Paquem密度梯度离心法获得单个核细胞,体外扩增培养后,电转染携带外源基因(OCT4, SOX2, KLF4, C-myc, LIN28, Nanog)的质粒,然后在加有化学小分子的特定培养基中分三步培养.结果 转染后30 d左右,可以获得血小板衍生生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor-α, PDGFR-α)阳性的早期少突胶质前体细胞(Pre-OPC),该细胞能传20 代以上,继续分化30 d左右可以获得表达O4的少突胶质前体细胞.结论 利用非整合质粒载体携带外源基因可以将成人外周血单个核细胞在较短期时间内重编程为具有增生能力的早期少突胶质前体细胞,且能继续分化为少突胶质前体细胞.

作者:唐玺和;李默;王淑艳;李鹏燕;张愚;陈志国;陈惠

来源:首都医科大学学报 2017 年 38卷 4期

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唐玺和;李默;王淑艳;李鹏燕;张愚;陈志国;陈惠
来源:
首都医科大学学报 2017 年 38卷 4期
标签:
外周血单个核细胞 重编程 少突胶质前体细胞 peripheral blood mononuclear cells cell reprogramming oligodendrocyte progenitor cells
目的 利用非整合质粒载体在体外将成人外周血中单个核细胞重编程为少突胶质前体细胞(oligodendrocyte progenitor cells, OPCs).方法 经外周静脉采集志愿者血液5 mL,利用Ficoll-Paquem密度梯度离心法获得单个核细胞,体外扩增培养后,电转染携带外源基因(OCT4, SOX2, KLF4, C-myc, LIN28, Nanog)的质粒,然后在加有化学小分子的特定培养基中分三步培养.结果 转染后30 d左右,可以获得血小板衍生生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor-α, PDGFR-α)阳性的早期少突胶质前体细胞(Pre-OPC),该细胞能传20 代以上,继续分化30 d左右可以获得表达O4的少突胶质前体细胞.结论 利用非整合质粒载体携带外源基因可以将成人外周血单个核细胞在较短期时间内重编程为具有增生能力的早期少突胶质前体细胞,且能继续分化为少突胶质前体细胞.