目的 探讨核仁素表达下调对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响.方法 实验分4组:3个靶向人核仁素基因的实验组(siN1组、siN2组、siN3组)及1个阴性对照组(NC组).体外化学合成各组siRNA并转染HeLa细胞；利用荧光实时定量RT-PCR法和Western blotting法分别从mRNA和蛋白水平检测核仁素基因的干扰效率,并筛选出干扰效率最高的片段；利用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)法检测核仁素下调对HeLa细胞增殖活性的影响；利用流式细胞学Annexin V-FITC检测转染后HeLa细胞凋亡率的改变；Transwell实验检测转染后细胞侵袭能力的改变.结果 与NC组相比,各实验组核仁素mRNA表达水平均下降(P＜0.05)；蛋白表达水平也相应下调(P＜0.05).成功筛选出最佳干扰片段siN2,用于后续实验.siN2组HeLa细胞生长速率明显受到抑制(P＜0.05)；流式细胞学Annexin V-FITC检测siN2组HeLa细胞凋亡率明显高于NC组(P ＜0.05)；Transwell实验显示siN2组HeLa细胞侵袭能力减弱(P＜0.05).结论 核仁素表达下调明显抑制宫颈癌Hela细胞增殖与侵袭能力,促进细胞凋亡,为宫颈癌的基因治疗提供了理论依据.
作者：刘洪丽；张友忠；吕昌帅；丁佰娟；王颉
来源：山东大学学报（医学版） 2013 年 51卷 11期
