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目的:探讨蠕形螨全蛋白提取方法,初步分析蠕形螨蛋白组分。方法采用自制裂解液和RIPA裂解液分别提取蠕形螨全蛋白,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE)分离比较蛋白提取效果,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定部分蛋白质条带,Mascot检索软件查询NCBInr数据库,对蠕形螨蛋白组分进行初步分析。结果自制裂解液提取蠕形螨蛋白的效果优于 RIPA裂解液。经数据库检索比对出21种可信蛋白,其中170 kD条带比对出的蛋白为肌动蛋白和胞质肌动蛋白,130 kD条带比对出的蛋白为谷氨酰胺连接酶和腺苷酰转移酶;15 kD以下条带比对出的蛋白大部分为组蛋白。结论自制裂解液液氮研磨法可提取到较高质量的蠕形螨全蛋白,实验提取并分析了蠕形螨的蛋白质组成,为蠕形螨蛋白组学研究奠定基础。

作者:朱晓丽;郭淑玲;苏磊;冯玉新;袁方曙

来源:山东大学学报(医学版) 2014 年 5期

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作者:
朱晓丽;郭淑玲;苏磊;冯玉新;袁方曙
来源:
山东大学学报(医学版) 2014 年 5期
标签:
蠕形螨 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白质组学 分子量 Demodex Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Proteomics Molecular weight
目的:探讨蠕形螨全蛋白提取方法,初步分析蠕形螨蛋白组分。方法采用自制裂解液和RIPA裂解液分别提取蠕形螨全蛋白,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE)分离比较蛋白提取效果,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定部分蛋白质条带,Mascot检索软件查询NCBInr数据库,对蠕形螨蛋白组分进行初步分析。结果自制裂解液提取蠕形螨蛋白的效果优于 RIPA裂解液。经数据库检索比对出21种可信蛋白,其中170 kD条带比对出的蛋白为肌动蛋白和胞质肌动蛋白,130 kD条带比对出的蛋白为谷氨酰胺连接酶和腺苷酰转移酶;15 kD以下条带比对出的蛋白大部分为组蛋白。结论自制裂解液液氮研磨法可提取到较高质量的蠕形螨全蛋白,实验提取并分析了蠕形螨的蛋白质组成,为蠕形螨蛋白组学研究奠定基础。