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目的 分析旋毛虫( Trichinella spiralis)肌幼虫排泄分泌蛋白(excretory-secretory protein,ESP)的组分,寻找其抗肿瘤活性组分.方法 收集纯净的旋毛虫脱囊肌幼虫,制备旋毛虫肌幼虫ESP.采用15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离ESP,将分离获得的所有蛋白条带进行胰蛋白酶酶解,采用液质联用质谱法(LC-MS/MS)进行鉴定.利用Gene Ontology (GO)对已鉴定蛋白质进行细胞组分、分子功能和生物过程的富集分析.结果 经SDS-PAGE电泳分离获得清晰的蛋白质条带,相对分子质量(Mr)为10 000~142 000.质谱分析共鉴定出162种蛋白质,其中63种为已明确鉴定的蛋白质,34种为假定蛋白质,65种为未鉴定的蛋白质.鉴定出6种与抗肿瘤相关的蛋白质,即原肌球蛋白、组蛋白H2A、剪切聚腺苷酸化特异因子亚基2、Kazal 4型丝氨酸蛋白酶抑制剂、犰狳极性蛋白和真核起始因子4A.GO富集分析显示,已鉴定的蛋白质具有54种不同的分子功能,参与细胞构成并参与382种生物过程.结论 旋毛虫肌幼虫ESP组分复杂,有多种未鉴定的蛋白质,从已知的63种蛋白质中筛选出6种与抗肿瘤相关的蛋白质.

作者:罗婧梅;程露阳;关晓东;李丹;于莉;杜娈英

来源:中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016 年 34卷 1期

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作者:
罗婧梅;程露阳;关晓东;李丹;于莉;杜娈英
来源:
中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016 年 34卷 1期
标签:
旋毛虫 排泄分泌蛋白 LC-MS/MS 质谱分析 Trichinella spiralis Excretory-secretory protein LC-MS/MS Mass spectrometry
目的 分析旋毛虫( Trichinella spiralis)肌幼虫排泄分泌蛋白(excretory-secretory protein,ESP)的组分,寻找其抗肿瘤活性组分.方法 收集纯净的旋毛虫脱囊肌幼虫,制备旋毛虫肌幼虫ESP.采用15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离ESP,将分离获得的所有蛋白条带进行胰蛋白酶酶解,采用液质联用质谱法(LC-MS/MS)进行鉴定.利用Gene Ontology (GO)对已鉴定蛋白质进行细胞组分、分子功能和生物过程的富集分析.结果 经SDS-PAGE电泳分离获得清晰的蛋白质条带,相对分子质量(Mr)为10 000~142 000.质谱分析共鉴定出162种蛋白质,其中63种为已明确鉴定的蛋白质,34种为假定蛋白质,65种为未鉴定的蛋白质.鉴定出6种与抗肿瘤相关的蛋白质,即原肌球蛋白、组蛋白H2A、剪切聚腺苷酸化特异因子亚基2、Kazal 4型丝氨酸蛋白酶抑制剂、犰狳极性蛋白和真核起始因子4A.GO富集分析显示,已鉴定的蛋白质具有54种不同的分子功能,参与细胞构成并参与382种生物过程.结论 旋毛虫肌幼虫ESP组分复杂,有多种未鉴定的蛋白质,从已知的63种蛋白质中筛选出6种与抗肿瘤相关的蛋白质.