目的：从噬菌体随机12肽库中筛选获得转化生长因子β1（TGF-β1）噬菌体模拟肽，评估其促进人正常皮肤成纤维细胞增殖的效果。方法以人TGF-β1单克隆抗体为靶，生物淘选噬菌体模拟肽。选择其中一组与TGF-β1基因序列相似度最高的噬菌体模拟肽，设定4组，阴性对照组、噬菌体M13对照组、TGF-β1对照组和噬菌体模拟肽组。噻唑蓝（MTT）比色法定量测定活细胞数量以检测细胞的增殖。免疫荧光方法检测噬菌体模拟肽与成纤维细胞的亲和力。实时定量PCR分析方法检测成纤维细胞I型胶原蛋白（COL1）、Ⅲ型胶原蛋白（COL3）和结缔组织生长因子（CTGF）的mRNA表达水平。结果共获得10种噬菌体模拟肽，选择与TGF-β1基因序列相似度最高的第一组噬菌体模拟肽进行实验。MTT结果显示，噬菌体模拟肽组能够促进成纤维细胞增殖（P＜0．05）。免疫荧光结果显示，噬菌体上的模拟肽，而非噬菌体本身，能够与成纤维细胞结合；实时定量PCR的结果显示，48 h噬菌体模拟肽组COL1和COL3 mRNA的表达水平较阴性对照组和噬菌体M13对照组均明显增高（P＜0．05），而CTGF的mRNA表达水平较阴性对照组和噬菌体M13对照组2 d时明显增高（P＜0．05），3 d时表达有所降低（P＜0．05）。结论噬菌体模拟肽可能是通过调节CTGF的表达，调节成纤维细胞的
作者：刘振中；姜笃银；王魏；宗宪磊；张基勋；刘磊
来源：山东大学学报（医学版） 2015 年 3期
