目的 探讨肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)调控大鼠心肌成纤维细胞(CFs)表达基质金属蛋白酶2(MMP2)及Ⅰ型胶原的作用机制.方法 胰酶消化法分离培养新生大鼠原代CFs,利用Western blotting法检测磷酸化ERK1/2 (p-ERK1/2)蛋白的表达水平,从而确定重组人TWEAK(rhTWEAK)及ERK1/2通路抑制剂PD98059对CFs的最佳干预浓度及干预时间.采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)以及Western blotting法检测干预后MMP2及Ⅰ型胶原的mRNA与蛋白表达水平,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同处理对细胞增殖的影响.结果 100 μg/L TWEAK干预CFs显著上调p-ERK1/2的蛋白表达、上调MMP2及Ⅰ型胶原mRNA与蛋白的表达水平,同时显著促进细胞增殖.抑制剂PD98059阻断ERK1/2通路后显著抑制MMP2与Ⅰ型胶原的mRNA及蛋白表达,抑制CFs的增殖.结论 TWEAK通过ERK1/2通路促进CFs表达MMP2及Ⅰ型胶原.
作者:巨媛媛;任满意;李睿;赵萌萌;隋树建
来源:山东大学学报(医学版) 2016 年 54卷 5期