目的：通过原核表达获取人 TIMP-2蛋白，探讨 TIMP-2在肝癌细胞迁移及侵袭中的作用。方法以SMMC-7721肝癌细胞总RNA为模板，用RT-PCR技术扩增出人TIMP-2基因cDNA，通过基因重组技术构建原核表达载体pGEX-TIMP-2并在大肠杆菌Origami（DE3）中诱导表达人TIMP-2重组蛋白。采用亲和层析法纯化表达产物，并用Western blotting鉴定；用RNAi技术和添加外源蛋白方法分析TIMP-2蛋白对肝癌细胞迁移和侵袭的作用；荧光定量PCR、Western blotting检测siRNA-TIMP-2转染细胞后肝癌细胞内源性TIMP-2的mRNA及蛋白表达水平。结果外源添加的TIMP-2蛋白抑制肝癌细胞迁移及侵袭的能力，而RNAi技术能抑制内源的TIMP-2蛋白增强肝癌细胞迁移及侵袭的能力；肝星状细胞的条件培养液能够促进肝癌细胞迁移和侵袭，而这种作用能够被TIMP-2蛋白抑制。结论肝癌微环境中的TIMP-2蛋白水平与肝癌细胞的迁移和浸润密切相关。
作者：王伟；曹煜姗；孙达权；黄小琼；徐国强
来源：山东大学学报（医学版） 2016 年 54卷 7期
