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目的 探讨miR-203-3p对狼疮性肾炎(LN)小鼠肾小管上皮细胞增殖凋亡的影响及其可能的分子机制.方法 选取自发性LN小鼠(LN组)和野生型C57BL/6小鼠(NC组)各8只,应用qRT-PCR法检测肾组织miR-203-3p表达水平,Western blotting法检测肾组织中髓细胞触发受体1基因(TREM1)蛋白表达水平.分离LN小鼠肾小管上皮细胞,并将miR-203-3p模拟物(miR-203-3p mimic)及其阴性对照(miR-NC)转染至肾小管上皮细胞中,采用qRT-PCR法检测转染后肾小管上皮细胞中miR-203-3p表达水平;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;ELISA法检测细胞中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)的表达水平;Western blotting法检测细胞中TREM1、Bax、Bcl-2、转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)和p38MAPK等蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-203-3p与TREM1之间的靶向关系.结果 与NC组小鼠比较,LN组小鼠肾组织中miR-203-3p表达水平降低(P<0.001),而TREM1蛋白表达水平升高(P<0.001).miR-203-3p过表达可显著抑制LN小鼠肾小管上皮细胞中TREM1蛋白表达(F=366.230,P<0.001),并且双荧光素酶报告基因实验证实TREM1是miR-203-3p的靶基因.此外,miR-203-3p过表达还可显著

作者:罗慧臣;胡丹慧;张济

来源:山东大学学报(医学版) 2021 年 59卷 3期

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作者:
罗慧臣;胡丹慧;张济
来源:
山东大学学报(医学版) 2021 年 59卷 3期
标签:
狼疮性肾炎 miR-203-3p 髓细胞触发受体1基因 TGF-β1/p38MAPK信号通路
目的 探讨miR-203-3p对狼疮性肾炎(LN)小鼠肾小管上皮细胞增殖凋亡的影响及其可能的分子机制.方法 选取自发性LN小鼠(LN组)和野生型C57BL/6小鼠(NC组)各8只,应用qRT-PCR法检测肾组织miR-203-3p表达水平,Western blotting法检测肾组织中髓细胞触发受体1基因(TREM1)蛋白表达水平.分离LN小鼠肾小管上皮细胞,并将miR-203-3p模拟物(miR-203-3p mimic)及其阴性对照(miR-NC)转染至肾小管上皮细胞中,采用qRT-PCR法检测转染后肾小管上皮细胞中miR-203-3p表达水平;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;ELISA法检测细胞中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)的表达水平;Western blotting法检测细胞中TREM1、Bax、Bcl-2、转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)和p38MAPK等蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-203-3p与TREM1之间的靶向关系.结果 与NC组小鼠比较,LN组小鼠肾组织中miR-203-3p表达水平降低(P<0.001),而TREM1蛋白表达水平升高(P<0.001).miR-203-3p过表达可显著抑制LN小鼠肾小管上皮细胞中TREM1蛋白表达(F=366.230,P<0.001),并且双荧光素酶报告基因实验证实TREM1是miR-203-3p的靶基因.此外,miR-203-3p过表达还可显著