目的 探讨蛋白精氨酸甲基转移酶 5(PRMT5)通过甲基化作用,修饰并上调泛素特异性蛋白酶 15(USP15)的蛋白水平,从而促进乳腺癌发生发展的作用.方法 采用基因表达谱交互分析(GEPIA2)在线数据库和Kaplan-Meier Plotter生存曲线分析,分析PRMT5 在肿瘤组织和正常组织中的表达差异,及其与乳腺癌患者临床预后的关系.采用免疫亲和纯化及银染联合质谱分析得到与PRMT5 结合的蛋白.通过慢病毒稳转技术在MCF-7 细胞中过表达或敲低PRMT5,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western blotting)技术检测细胞内相关蛋白的表达.质粒或小干扰RNA(siRNA)转染技术敲低或过表达USP15,qRT-PCR及Western blotting技术检测细胞内相关蛋白表达,采用细胞活性实验(CCK8)、克隆形成和Transwell实验检测其对乳腺癌细胞增殖与侵袭能力的影响.利用EPZ015666(GSK3235025)小分子抑制剂抑制PRMT5 甲基转移酶活性后,采用Western blotting技术检测细胞内相关蛋白的变化,采用 CCK8 和 Transwell 实验检测其对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响.结果 生物信息学分析结果显示,PRMT5 在乳腺癌患者中高表达并与乳腺癌患者不良预后相关.免疫亲和纯化及银染联合质谱分析并通过免疫共沉淀(Co-IP)实验验证,发现PRMT5 与USP15 存在相互结合.在乳腺癌细

作者：金珊；高杰；谢玉姣；展垚；杜甜甜；王传新

来源：山东大学学报（医学版） 2023 年 61卷 7期