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目的 探讨人骨肉瘤细胞(U-2 OS)对甲氨蝶呤(MTX)耐药的机制.方法 采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,对U-2 OS细胞进行诱导培养,建立4株耐药细胞株U-2 OS/R1~U-2 OS/R4.MTT法检测并比较各细胞亚系对MTX的敏感性,半定量RT-PCR法检测各亚系还原性叶酸载体(RFC)、二氢叶酸还原酶(DHFR)mRNA表达.结果 本实验成功建立了4株MTX耐药细胞亚系,即U-2 OS/R1~U-2 OS/R4;MTT法显示各亚系耐药性逐渐增加,MTX耐药与RFC mRNA表达降低及DHFR mRNA表达增加相关(P<0.05).结论 RFC、DHFR mRNA参与了U-2 OS细胞的MTX耐药;测定RFC、DHFR基因状态有助于筛选MTX耐药的骨肉瘤患者.

作者:刘金超;李书忠

来源:山东医药 2008 年 48卷 17期

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作者:
刘金超;李书忠
来源:
山东医药 2008 年 48卷 17期
标签:
还原性叶酸载体 二氢叶酸还原酶 甲氨蝶呤 骨肉瘤 耐药
目的 探讨人骨肉瘤细胞(U-2 OS)对甲氨蝶呤(MTX)耐药的机制.方法 采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,对U-2 OS细胞进行诱导培养,建立4株耐药细胞株U-2 OS/R1~U-2 OS/R4.MTT法检测并比较各细胞亚系对MTX的敏感性,半定量RT-PCR法检测各亚系还原性叶酸载体(RFC)、二氢叶酸还原酶(DHFR)mRNA表达.结果 本实验成功建立了4株MTX耐药细胞亚系,即U-2 OS/R1~U-2 OS/R4;MTT法显示各亚系耐药性逐渐增加,MTX耐药与RFC mRNA表达降低及DHFR mRNA表达增加相关(P<0.05).结论 RFC、DHFR mRNA参与了U-2 OS细胞的MTX耐药;测定RFC、DHFR基因状态有助于筛选MTX耐药的骨肉瘤患者.